ژن مقاومت به کارباپنم (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
نام محصول
کیت تشخیص ژن مقاومت به کارباپنم HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR فلورسانس)
اپیدمیولوژی
آنتی‌بیوتیک‌های کارباپنم، آنتی‌بیوتیک‌های بتالاکتام غیرمعمول با وسیع‌ترین طیف ضدباکتریایی و قوی‌ترین فعالیت ضدباکتریایی هستند. به دلیل پایداری در برابر بتالاکتاماز و سمیت کم، به یکی از مهم‌ترین داروهای ضدباکتری برای درمان عفونت‌های شدید باکتریایی تبدیل شده است. کارباپنم‌ها در برابر بتالاکتامازهای طیف گسترده (ESBLs) با واسطه پلاسمید، کروموزوم‌ها و سفالوسپورینازهای واسطه پلاسمید (آنزیم‌های AmpC) بسیار پایدار هستند.
کانال
| PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
| فام | آی ام پی | ویم |
| ویک/هکس | کنترل داخلی | کنترل داخلی |
| سی وای ۵ | ان دی ام | کی پی سی |
| راکس | OXA48
| OXA23 |
پارامترهای فنی
| ذخیره‌سازی | ≤-18℃ |
| ماندگاری | ۱۲ ماه |
| نوع نمونه | خلط، کلنی‌های خالص، سواب رکتوم |
| Ct | ≤۳۶ |
| CV | ≤5.0٪ |
| لود | 103CFU/میلی‌لیتر |
| ویژگی | الف) کیت، مرجع‌های منفی استاندارد شرکت را تشخیص می‌دهد و نتایج، الزامات مرجع‌های مربوطه را برآورده می‌کند. ب) نتایج آزمایش واکنش متقاطع نشان می‌دهد که این کیت هیچ واکنش متقاطعی با سایر پاتوژن‌های تنفسی مانند کلبسیلا پنومونیه، آسینتوباکتر بومانی، سودوموناس آئروژینوزا، استرپتوکوک پنومونیه، نایسریا مننژیتیدیس، استافیلوکوکوس اورئوس، کلبسیلا اکسی توکا، هموفیلوس آنفولانزا، آسینتوباکتر جونی، آسینتوباکتر همولیتیکوس، لژیونلا پنوموفیلا، اشریشیا کلی، سودوموناس فلورسنس، کاندیدا آلبیکنس، کلامیدیا پنومونیه، آدنوویروس تنفسی، انتروکوک یا نمونه‌های حاوی سایر ژن‌های مقاوم به دارو CTX، mecA، SME، SHV، TEM و غیره ندارد. ج) ضد تداخل: موکین، مینوسیکلین، جنتامایسین، کلیندامایسین، ایمیپنم، سفوپرازون، مروپنم، سیپروفلوکساسین هیدروکلراید، لووفلوکساسین، کلاولانیک اسید، روکسی‌ترومایسین برای آزمایش تداخل انتخاب شده‌اند و نتایج نشان می‌دهد که مواد تداخل‌کننده فوق‌الذکر هیچ واکنش تداخلی در تشخیص ژن‌های مقاومت به کارباپنم KPC، NDM، OXA48، OXA23، VIM و IMP ندارند. |
| ابزارهای کاربردی | سیستم‌های PCR بلادرنگ Applied Biosystems 7500 سیستم‌های PCR بلادرنگ QuantStudio®5 سیستم‌های PCR بلادرنگ SLAN-96P (شرکت فناوری پزشکی هونگشی، با مسئولیت محدود) سیستم PCR بلادرنگ LightCycler®480 سیستم تشخیص PCR بلادرنگ LineGene 9600 Plus (FQD-96A،هانگژوفناوری زیستی) دستگاه چرخه حرارتی کمی بلادرنگ MA-6000 (شرکت سوژو مولاری) سیستم PCR بلادرنگ BioRad CFX96 سیستم PCR بلادرنگ BioRad CFX Opus 96 |
جریان کار
گزینه ۱.
معرف استخراج توصیه شده: کیت عمومی DNA/RNA ماکرو و میکرو تست (HWTS-301)9-50، HWTS-3019-32، HWTS-3019-48، HWTS-3019-96) (که می‌تواند با دستگاه استخراج خودکار اسید نوکلئیک Macro & Micro-Test (HWTS-3006C، HWTS-3006B) ساخت شرکت Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech استفاده شود. 200 میکرولیتر محلول نمکی نرمال به رسوب تالوس اضافه کنید. مراحل بعدی باید طبق دستورالعمل استخراج باشد و حجم شویش توصیه شده ...100 میکرولیتر.
گزینه ۲.
معرف استخراج توصیه شده: معرف استخراج یا خالص‌سازی اسید نوکلئیک (YDP302) ساخت شرکت Tiangen Biotech (پکن). استخراج باید دقیقاً مطابق مرحله 2 دستورالعمل استفاده شروع شود (200 میکرولیتر بافر GA را به رسوب تالوس اضافه کنید و تکان دهید تا تالوس کاملاً به حالت تعلیق درآید). از آب بدون RNase/DNase برای شستشو استفاده کنید و حجم شستشوی توصیه شده 100 میکرولیتر است.
گزینه ۳.
معرف استخراج توصیه شده: معرف آزادسازی نمونه ماکرو و میکرو تست. نمونه خلط باید با اضافه کردن 1 میلی لیتر محلول نمکی نرمال به رسوب تالوس تیمار شده فوق الذکر شسته شود، به مدت 5 دقیقه با سرعت 13000 دور در دقیقه سانتریفیوژ شود و مایع رویی دور ریخته شود (10 تا 20 میکرولیتر از مایع رویی را نگه دارید). برای کلنی خالص و سواب رکتوم، 50 میکرولیتر از معرف آزادسازی نمونه را مستقیماً به رسوب تالوس تیمار شده فوق الذکر اضافه کنید و مراحل بعدی باید طبق دستورالعمل استفاده استخراج شود.
